Absztrakt

A sterilizáló szűrési folyamat validálása kritikus lépés annak biztosításában, hogy a gyógyszeripari termékek megfeleljenek a sterilitási követelményeknek a gyártás során. Ez az érvényesítési folyamat elengedhetetlen a termékminőség és a betegbiztonság garantálásához. Ez a cikk áttekinti a kulcsfontosságú validációs vizsgálatok céljait, vizsgálati módszereit és elfogadási kritériumait, beleértve a következőket:kémiai kompatibilitási vizsgálat, bakteriális retenciós vizsgálat, éskivonható és kioldható anyagok (E&L) tesztelése.

A sterilizáló szűrés egy fizikai elválasztási eljárás, amely a membrán megtartásával eltávolítja a mikroorganizmusokat a folyadékokból vagy gázokból. Meghatározott folyamatkörülmények között a szűrőnek képesnek kell lennie visszatartásra10⁷ CFU/cm²aBrevundimonas diminutanégyzetcentiméterenként a hatékony szűrési területet a termék sterilitásának biztosítása érdekében.

A2023. évi GMP irányelvek steril készítményekhez (I. kötet)ésPDA műszaki jelentés No{0}} (TR26): Folyadékok sterilizáló szűréseátfogó útmutatást ad a sterilizáló szűrés érvényesítéséhez. Az érvényesítési tevékenységek közé tartozik a szűrő kiválasztása, a baktériumok visszatartásának vizsgálata, az integritás vizsgálata, valamint a szűrő és a technológiai folyadék közötti kompatibilitás értékelése. Az útmutató kiemeli a szűrősterilizálási módszereket, a-használat utáni integritástesztet és a szűrők újrafelhasználásával kapcsolatos megfontolásokat is.

A GMP és PDA TR26 ajánlások betartásával a gyógyszergyártók hatékonyan végrehajthatják és validálhatják a sterilizáló szűrési eljárásokat. A sterilizálási szűrés validálása azonban továbbra is összetett tevékenység, amely több technikai megfontolást is magában foglal, és egyre nagyobb hangsúlyt kapott a GMP ellenőrzések során. Ez a cikk a fő validációs vizsgálatokat, a megfelelő érvényesítési stratégiákat és a kritikus kontrollpontokat tárgyalja az érvényesítési folyamat során.

 

1. Kémiai kompatibilitási vizsgálat

A kémiai kompatibilitási vizsgálat azt értékeli, hogy a sterilizáló szűrőpatron nemkívánatos kémiai reakciókon vagy kölcsönhatásokon megy keresztül a technológiai folyadékkal meghatározott működési feltételek mellett.

1.1 A kémiai kompatibilitás vizsgálati módszerei

A kémiai kompatibilitást általában két megközelítés egyikével értékelik:

Statikus beázási teszt

Dinamikus recirkulációs szűrési teszt

Astatikus beázási teszt, a szűrő vagy a membrán a folyamatfolyadékba merül a legrosszabb-eseti körülmények között. A szűrő vagy membrán fizikai jellemzőit az expozíció előtt és után mérik.

Adinamikus recirkulációs teszt, a szűrő a technológiai folyadékot tartalmazó tartályhoz és csőrendszerhez csatlakozik. Egy perisztaltikus szivattyú folyamatosan keringeti a folyadékot a szűrőkörön keresztül, hogy szimulálja a tényleges gyártási körülményeket. A vizsgálat után összehasonlítják a szűrő fizikai tulajdonságait szűrés előtt és után.

1.2 Tesztparaméterek

A kémiai kompatibilitási vizsgálatoknak értékelniük kell aa teljes szűrőegységet.

A folyamat körülményeinek a szűrőre gyakorolt ​​hatásait a következő változások figyelésével lehet értékelni:

A szűrő teljes integritása (beleértve a membránt, a házat, az O{0}}gyűrűket stb.)

Kivonható anyagok

Szakítószilárdság

Áramlási sebesség

Nyomáskülönbség

Szűrő minőség

A szűrő megjelenése

Pásztázó elektronmikroszkópos (SEM) megfigyelések

Feltörési nyomás

A rutin értékelések általában tartalmazzák az áztatás vagy szűrés előtti és utáni integritásvizsgálatot, valamint a szűrő fizikai méreteinek mérését, beleértve:

Hossz

Átmérő

Súly

Ezenkívül az értékelést igénylő membrán jellemzők a következők:

Felületi megjelenés

Vastagság

Membrán szerkezet

Pórusméret

Szakítószilárdság

Ezen paraméterek közül a membránszerkezetet és a pórusméretet általában pásztázó elektronmikroszkóppal (SEM) jellemzik.

1.3 Elfogadási feltételek

A vizsgálat során a szűrőnek és a membránnak sikeresen át kell mennie minden integritási teszten.

Szemrevételezéssel meg kell erősíteni:

Nincs deformáció

Nincs részecskevesztés

Nincs elszíneződés

Más fizikai paraméterek, például átmérő, tömeg és vastagság esetén a relatív eltérés±2% és ±5% közöttáltalában elfogadhatónak tartják.

 

2. Baktériumvisszatartási vizsgálat

Bár a gyógyszergyártásban használt sterilizáló{0}}minőségű membránszűrők névleges pórusmérete jellemzően0.22 μm, a pórusméret önmagában nem reprezentálja megfelelően a szűrő mikroorganizmus-megtartó képességét.

2.1 Vizsgálati módszer

A baktérium-visszatartási tesztet általában aASTM F838-20által közzétett standard vizsgálati módszerASTM Internationala sterilizáló -minőségű membránszűrők baktériummegtartó képességének értékeléséhez.

2.2 Pozitív kontroll teszt

A viszonylag nagy sejtméretű mikroorganizmusok által okozott hamis{0}}negatív eredmények megelőzése érdekében igazolni kell, hogy a kiváltó szervezet átjut egy0,45 μm membrán, amely a pozitív kontroll kritériumaként szolgál.

Brevundimonas diminutastandard tápközegben tenyésztett táptalajt használjuk kihívó szervezetként. Nagy kihívást jelentő körülmények között (általábanNagyobb vagy egyenlő, mint 10⁷ CFU/cm²hatékony szűrési terület), kis számú baktérium képes behatolni a0.45 μmmembrán.

A baktériumszuszpenziót átszűrjük a0,45 μm membrána tesztszűrővel párhuzamosan működnek. Az alsó szűrletet ezután egy másikon átszűrjük0.45 μmvagy0,22 μm membrán. Ha a fertőzést okozó baktériumok kellően kicsik, akkor átjutnak az első membránon, és az alsó membrán megtartja őket.

2.3 Bakteriális életképességi teszt

A bakteriális életképességi teszt célja, hogy értékelje a fertőzést okozó szervezet túlélési képességét a folyamatfolyadékban, és meghatározza, hogy a technológiai folyadék bakteriosztatikus aktivitást mutat-e.

Steril0,9%-os fiziológiás sóoldatjellemzően kontrolloldatként használják. Egy meghatározott koncentrációbanBrevundimonas diminuta (e.g., >108 CFU/ml) mind a folyamatfolyadékba, mind a kontrolloldatba beoltják. A mikrobapopuláció változásait a folyamat meghatározott időtartama alatt nyomon követik.

Ha a folyamatfolyadékban az életképes mikroorganizmusok száma alegfeljebb 1 naplóa kontrolloldathoz képest a folyamatfolyadékot veszik figyelembenem-bakteriosztatikusa kihívást jelentő szervezet felé. Ezzel szemben a csökkentés meghaladja1 naplóazt jelzi, hogy a technológiai folyadék bakteriosztatikus tulajdonságokkal rendelkezik.

2.4 A vizsgálóberendezés sterilizálása

A bakteriális provokáció vizsgálata előtt a teljes tesztkészüléket sterilizálni kellnedves hő sterilizálása sterilitás biztosítása érdekében. A gőzsterilizálást általában a121 fokon 30 percig.

2.5 Szűrő kiválasztása

Mivel a mikrobiális visszatartás korrelál az eredményekkel aroncsolásmentes buborékpont-teszt, a magasabb buborékpont általában magasabbnak felel megNaplócsökkentési érték (LRV). Ezért a baktérium-visszatartási vizsgálatokat lehetőleg olyan szűrőpatronok használatával kell elvégezni, amelyek viszonylagos gyártási tételekből állnak.alacsonyabb buborékpont értékek, ami a legrosszabb-esetet jelenti.

A bakteriális visszatartási képesség validálása általában magában foglaljahárom különböző gyártási tételmembránszűrők. Legalább egy tételnek át kell mennie a fizikai integritásteszten, miközben a megadott eredményeket produkáljaA gyártó minimálisan elfogadható specifikációjának 10%-a, ezáltal egy marginális feltételt jelent.

Hasonlóképpen, mertdiffúz áramlási teszt eredményeia mikrobiális visszatartási teljesítménnyel is korrelálnak, ha a diffúziós áramlási tesztet választják integritásvizsgálati módszerként, a szűrőpatronokhatárvonali diffúz áramlási értékekbe kell vonni a bakteriális retenciós vizsgálatba. A három értékelt szűrő közül legalább az egyiknek marginális diffúziós áramlási eredményt kell mutatnia.

2.6. Elfogadási kritériumok a baktérium-visszatartási vizsgálathoz

A bakteriális retenciós vizsgálat elfogadási kritériumainak tartalmazniuk kell legalább a következő négy követelményt:

1.Nincsenek kolóniákBrevundimonas diminutaA vizsgálati szűrő után az analitikai membránon kell kimutatni.

2. KolóniáiBrevundimonas diminutameg kell figyelni a pozitív kontrollvizsgálatban használt analitikai membránon.

3. A teljes vizsgálati berendezésnek sterilnek kell maradnia a vizsgálat során.

4. A bakteriális provokációs szuszpenziónak meg kell felelnie az előírt fertőzési szintnek, és legalább1 × 10⁷ CFU azBrevundimonas diminutaeffektív szűrési terület négyzetcentiméterére.

Ezenkívül a szűrőnek sikeresen át kell mennie mindkettőnelő-kihíváséstegyen fel-a kihívás integritástesztjeit, és minden mért integritási értéknek a gyártó által meghatározott elfogadási határokon belül kell maradnia.

 

3. Kivonható anyagok és kioldható anyagok (E&L) tesztelése

Annak biztosítása érdekében, hogy a technológiai folyadék és a szűrő közötti közvetlen érintkezés ne eredményezzen anyagok kijutását a szűrőből a technológiai közegbe, és ne idézzen elő kémiai reakciókat az érintkező felületek között, amelyek új vegyületeket képeznek,kivonható és kioldható anyagok (E&L) tanulmányoka sterilizáló szűrési folyamat validálásának részeként kell elvégezni.

3.1. Vizsgálati módszerek extrahálható anyagokhoz és kioldható anyagokhoz

Az extrahálható anyagok és kioldható anyagok vizsgálata fontos biztonsági értékelés, amelyet a sterilizáló szűrőpatronokból gyógyszerészeti termékekké migráló kémiai vegyületek értékelésére használnak.

Általában olyan modell oldószereket kell kiválasztani, amelyek nagyon hasonlítanak a végső gyógyszerkészítményhez. Ezeknek az oldószereknek a késztermékével azonos vagy ahhoz hasonló fizikai és kémiai jellemzőkkel kell rendelkezniük.

A kivonható anyagok tesztelését általában a következők valamelyikével végzik:

Statikus elszívás (áztatás)

Dinamikus recirkulációs elszívás

meghatározott legrosszabb-eseti körülmények között.

3.2 Analitikai módszerek extrahálható anyagokhoz és kioldható anyagokhoz

A szűrőpatronokból az extrakciós közegbe felszabaduló extrahálható anyagok és kioldható anyagok különféle vegyületosztályokat tartalmazhatnak, beleértve:

Illékony szerves vegyületek (VOC)

Félig{0}}illékony szerves vegyületek (SVOC)

Hőre labilis szerves vegyületek

Antioxidánsok

Nem{0}}illékony anyagok

Az illékony és félig{0}}illékony szerves vegyületeket, valamint a termikusan labilis vegyületeket és az antioxidánsokat gyakran elemzikGázkromatográfia – tömegspektrometria (GC–MS)ésFordított-fázisú, nagy{1}}teljesítményű folyadékkromatográfia (RP-HPLC).

A nem{0}}illékony anyagokat általában a következőkkel jellemezzükMágneses magrezonancia (NMR)spektroszkópia ésFourier transzformációs infravörös spektroszkópia (FTIR).

3.3 A kivonható anyagok és kioldható anyagok toxikológiai értékelése

Olyan tényezők alapján, mint a kivonható vagy kioldódó anyagok koncentrációja a kész gyógyszerkészítményben, a beadott dózis, a kezelés időtartama és az adagolás módja, átfogó biztonsági értékelést kell végezni aICH Q3CvagyICH M7iránymutatások annak biztosítására, hogy a szűrőanyagokból kivont vagy a gyártás során felszabaduló anyagok ne jelentsenek potenciális kockázatot az emberi egészségre.

Ezen értékelés során az egyes extrahálható vagy kioldható anyagok kémiai összetételét alaposan jellemezni kell, hogy megkönnyítsék annak további értékelését, hogy bármely vegyület tartalmaz-e szerkezeti figyelmeztetést vagy egyéb toxikológiai szempontból aggályos kémiai jellemzőt.

 

4. Következtetés

A sterilizáló szűrési eljárások validálása több mintkémiai kompatibilitási vizsgálat, bakteriális retenciós vizsgálat, éskivonható és kioldható anyagok vizsgálata. További vizsgálatok, beleértveadszorpciós teljesítmény értékeléseéssértetlenség vizsgálata a tényleges terméket nedvesítő folyadékként használvaadott esetben le is kell végezni.

Ezeket a hitelesítési tevékenységeket a technológiai folyadék jellemzőinek és a speciális gyártási feltételeknek megfelelően kell megtervezni, hogy biztosítsák a sterilizáló szűrési folyamat hatékonyságának átfogó ellenőrzését.

Továbbá, amikor változások következnek be atermék, szűrő, vagyfolyamat paraméterei, a korábban minősített sterilizáló szűrési eljárás érvényességét újra kell értékelni. Ezért a kezdeti folyamatellenőrzés befejezése után a termék jellemzőinek és a folyamat feltételeinek időszakos értékelését kell végezni annak megállapítására, hogyújraérvényesítésszükséges a szűrési folyamat folyamatos hatékonyságának és biztonságának biztosításához.

 

Referencia

Liang, X.Beszélgetés a sterilezési szűrési eljárások validálásáról a steril gyógyszergyártásban.
Guangdong Vegyipar, 2025, 52(15): 54–55.